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Uma nova opção de controle de colesterol específica para o local e uma maneira melhor de avaliar o status da vitamina D em cuidados intensivos. Leia sobre artigos sobre esses tópicos publicados recentemente noJornal de pesquisa lipídica.

O colesterol é um componente essencial das membranas celulares dos mamíferos. Sua forma não esterificada ou livre, localizada no plasma, controla as propriedades mecânicas da bicamada lipídica, como rigidez e permeabilidade. O colesterol também interage diretamente com uma ampla variedade de proteínas celulares na membrana plasmática, regulando assim a sinalização celular.

Os pesquisadores manipulam os níveis de colesterol celular por meio de extração química e enriquecimento do colesterol com metil-beta-ciclodextrina, ou adutos MβCD e MβCD-colesterol, respectivamente; ou pela inibição da biossíntese de novo colesterol celular pelas estatinas. Esses métodos são convenientes, mas não possuem controle específico do local dos níveis de colesterol nas células. Além disso, podem causar depleção inespecífica do colesterol que exerce efeitos nocivos nas células, incluindo morte celular e alteração inespecífica da fisiologia celular.

Ha Pham e uma equipe de pesquisadores da Universidade de Illinois em Chicago e da Universidade da Austrália Ocidental, em Perth, desenvolveram um novo sistema que permite a depleção de colesterol induzível e específica do local. Eles criaram uma colesterol oxidase bacteriana geneticamente codificada, cuja atividade de ligação à membrana é alterada de uma forma que permite o controle espaço-temporalmente específico de seu direcionamento à membrana por dimerização quimicamente induzida com uma proteína parceira localizada em um local específico da membrana. A equipe documentou o sistema e suas descobertas em um artigo de pesquisa recente publicado noJornal de pesquisa lipídica.

Em combinação com imagens quantitativas de colesterol e ensaios de atividade de sinalização, este novo sistema permitirá a determinação inequívoca de funções específicas do local do colesterol em diversas membranas celulares, incluindo a membrana plasmática e a membrana lisossomal.

A vitamina D ajuda a regular os níveis de cálcio e fósforo, desempenha um papel na manutenção da estrutura óssea adequada e regula a função imunológica. A deficiência de vitamina D resulta em doenças ósseas, como o raquitismo, bem como em cancro e doenças cardiovasculares, e está associada ao aumento do risco de infeções respiratórias, incluindo a COVID-19.

Quando absorvida pelo organismo, a vitamina D é metabolizada em 25-hidroxivitamina D, ou 25OH-D, que é frequentemente usada como biomarcador para medir os níveis de vitamina D no organismo. A espectrometria de massa em tandem com cromatografia líquida, ou LC-MS/MS, é o padrão ouro para a determinação quantitativa de 25OH-D, e esta técnica tem várias vantagens sobre os imunoensaios usados ​​anteriormente, incluindo maior seletividade, limites de detecção mais baixos e maior precisão.

Pesquisadores da Universidade McMaster e do Children's Hospital of Eastern Ontario Research Institute desenvolveram um método de alto rendimento para avaliar o status de vitamina D a partir de amostras de sangue com base em infusão direta – MS/MS, ou DI-MS/MS, após derivatização por clique usando 2- nitrosopiridina, que é otimizada para análise mais rápida que LC-MS/MS e maior precisão que um imunoensaio comercial.

Num estudo de teste comparativo, Erick Helmeczi e uma equipe descobriram que as concentrações de 25OH-D de amostras de sangue de referência medidas por DI-MS/MS eram menos tendenciosas do que o imunoensaio comercial quando comparado com LC-MS/MS. Descobriram que, em comparação com o DI-MS/MS, o imunoensaio comercial, frequentemente utilizado para rastreio em ensaios clínicos, subestima a prevalência da deficiência de vitamina D em crianças gravemente doentes que poderiam beneficiar de suplementos de vitamina D em doses elevadas.

Essas descobertas, publicadas em um artigo noJournal of Lipid Research, mostram que DI-MS/MS pode ser usado para avaliar o status da vitamina D de forma rápida e confiável em ensaios clínicos e estudos em larga escala. Os pesquisadores concentrarão esforços futuros na adaptação deste método para fins de relato de valores clínicos.